Analysis of effectiveness of the Cre/loxp site-specific recombinase system through subsequent generations of Arabidopsis thaliana transformants
Journal Title: Вісник Українського товариства генетиків і селекціонерів - Year 2015, Vol 13, Issue 1
Abstract
Aim. The aim of the work was to analyze the effectiveness of the Cre/loxP site-specific recombinase system through subsequent generations of Arabidopsis thaliana transformants. Methods. The increase in the number of marker-free Arabidopsis thaliana transformants was studied through several subsequent generations. Genetic transformation of plants was carried out using the Cre/loxP site-specific recombinase system under the control of 35S promoter. For this purpose two types of DNA constructs were designed that contain the marker gene gus and the recombinase gene cre flanked by loxP sites. Hygromycin resistance gene hptII in both constructs was moved out of the loxP sites, and in the case of excision event it remained in plant genome. The selection of transformants was performed on Murashige and Scoog medium with hygromycine (100 mg/l). The recombinase-mediated excision event of marker genes in genome was determined by histochemical analysis and molecular genetic analysis of three subsequent generations of transformants. Results. The number of marker-free transformants was increased with each subsequent generation for both types of DNA-constructs. Moreover, the reduction in the total amount of integrated T-DNA per genome to a minimum was identified by molecular-genetic analysis that indicates the ability of the Cre/loxP site-specific recombinase system to control the number of the integration events in plant genome. Conclusions. The developed approach is simple in usage and effective tool for obtaining marker-free transformed plants.Keуwords: selective marker genes, removal of marker genes, site-specific recombinase.
Authors and Affiliations
A. S. Sekan
Keywords
Related Articles
- EP ID EP613850
- DOI -
- Views 83
- Downloads 0
Strengthening Cooperation in Molecular Biomedicine between EU and Ukraine: the COMBIOM experience
Відділ генетики клітинних популяцій Інституту молекулярної біології і генетики НАН України: історія та головні наукові здобутки (до 30-річчя від часу заснування)
У статті коротко розглянуто основні віхи історії Відділу генетики клітинних популяцій, створеного у 1988 р. в Інституті молекулярної біології і генетики постановою Президії АН УРСР. Саме у цьому Відділі та його попередни...
"Magic Wand" of biology – the gift of a monk from Brno. On the 150th anniversary of the publication of the work of G. Mendel "Experiments on Plant Hybrids"
The paper presents the biographical data of Gregor Mendel, the founder of modern genetics, and discusses the role of his article "Experiments on Plant Hybrids" as the scientific work, which has become one of the key fact...
Сигнальная функция β-катенина важна на начальной стадии развития патологической гипертрофии взрослого сердца
Распространение сердечно-сосудистых заболеваний, их угроза здоровью и весомая социально-экономическая нагрузка обусловливают значительный интерес ученых к решению этой проблемы. В последнее время актуальными становятся н...
Стовбуровий потенціал нової лінії клітин людини 4BL
При отриманні клітинної лінії дослідників у першу чергу цікавлять такі характеристики як морфологія та імунофенотип, що дозволяє визначити приналежність клітин до того чи іншого типу та відповідно, окреслити галузі її за...