ПЛР-тест для ідентифікації та видової диференціації Waddlia chondrophila
Journal Title: Науковий вісник Львівського національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.З. Гжицького - Year 2019, Vol 21, Issue 93
Abstract
Останнім часом кількість видів хламідій, пов’язаних з рядом запальних захворювань тварин, значно розшилась. Більш того, окрім хламідій, увагу привернули хламідіє-подібні організми, які не тільки є небезпечними для тварин, але й несуть зоонозну загро-зу. Найбільш вивченими, на даний момент хламідіє-спорідненими організмами є Waddlia chondrophila та Parachlamydia acan-thamoebae, їх пов’язують з захворюваннями репродуктивної та респіраторної систем великої рогатої худоби та людини. З огляду на небезпечність для тварин і зоонозну загрозу хламідіє-подібних організмів та відсутністю доступного способу їх дослідження метою нашої роботи стало розроблення ПЛР – тесту для ідентифікації і видової диференціації Waddlia chondrophila. При розробці ПЛР – тест система для виявлення Waddlia chondrophila в якості генів-мішеней були обрані консервативні гени 16S pРНК. Праймери підбиралися таким чином, щоб була можливість створення мультиплексних поєднань з раніше розробленою нами ПЛР-тест-системою з Parachlamydia acanthamoebae. Ці праймери були розроблені з однаковими фізичними характеристи-ками, щоб мати можливість забезпечити одночасну ампліфікацію в однакових умовах в одиночних або мультиплексних ПЛР. Для оцінки специфічності праймерів використовувалася панель зразків ДНК: Waddlia chondrophila, Parachlamydia acanthamoebae, Chlamydia avium, Chlamydia pecorum, Chlamydia abortus, Chlamydia psittaci, Chlamydia suis, Chlamydia caviae, Clavochlamydia salmonicola, Piscichlamydia salmonis. Праймери давали продукт ПЛР 123 пари нуклеотидів (п.н.) тільки тоді, коли у зразку була присутня контрольна ДНК Waddlia chondrophila, як і очікувалося. Незначний розмір ПЛР-продукту теоретично дозволяє викорис-товувати дану пару олігонуклеотидних праймерів і для ПЛР-тестів в реальному часі. Розроблена ПЛР тест-система для ідентифікації та видової диференціації Waddlia chondrophila після апробації на клінічному матеріалі може бути використана вченими для широкого моніторингу, використовуватись лікарями ветеринарної медицини для уточнення діагнозу, бути введеними в практику лабораторій ветеринарної медицини та гуманної медицини.
Authors and Affiliations
В. К. Зезекало, С. Б. Передера, Т. В. Буслик, К. Ф. Почерняєв
РЕТИНОЛДЕФІЦИТНА НЕПЛІДНІСТЬ ОВЕЦЬ ТА КІЗ: ФАРМАКОЛОГІЧНА КОРЕКЦІЯ І ПРОФІЛАКТИКА
Використання у комплексних програмах фармакологічної корекції та превенції аліментарної ретинолдефіцитної неплідності овець та кіз оригінальних вітамінно-гормональних препаратів, що містять каротин, забезпечує поліпшення...
Фармако–токсикологічна оцінка препарату «Цифлур»
У статті наведено результати досліджень місцево–подразнюючої дії нового інсектоакарицидного препарату «Циф-лур», на основі синтетичного піретроїду цифлутрину, виробництва НВФ «Бровафарма». Встановлено, що препарат у досл...
Напрями удосконалення регуляторної політики розвитку малого підприємництва на сільських територіях
На сучасному етапі розбудови держави на сільських територіях має місце складна економічна та соціальна ситуація, переду-сім у сфері формування і функціонування сектора малого підприємництва. Недостатнє врахування специфі...
Уміст мікроелементів у тканинах медоносних бджіл за згодовування цукрового сиропу, борошна сої і цитратів Со та Ni
Подано результати досліджень впливу підгодівлі бджіл цукровим сиропом з додаванням борошна з бобів сої сорту Чер-нівецька–9, а також різних кількостей «наноаквацитратів» Со і Ni в умовах термостату на вміст Fe, Co, Cu, Z...
Морфологічна характеристика плаценти овець при фетоплацентарній недостатності та корекції препаратом «Карафест + ОV»
Метою роботи було дослідити морфологічні та гістологічні зміни плаценти при фетоплацентарній недостатності. Щоб досягти поставленої мети, нами було досліджено клітинний склад вагінального мазка вагітних, проведені деякі...