重组质粒pSUPER-HBs RNAi的构建及筛选
Journal Title: Di-er Junyi Daxue Xuebao - Year 2008, Vol 29, Issue 12
Abstract
目的:利用pSUPER-RNAi载体系统进行HBs RNAi序列的初步筛选和干扰效果鉴定。方法:设计并合成针对HBs基因区的3条siRNA(HBs-siRNA1、HBs-siRNA2、HBs-siRNA3),构建3种重组载体pSUPER-HBs-siRNA,与HBV质粒同时瞬转人胚肾293T细胞,72 h后观察转染效果,实时定量PCR和ELISA法鉴定3种干扰序列对HBs的干扰效果,筛选最佳干扰序列。结果:成功构建3种干扰质粒pSUPER-HBs-siRNA,能高效转染人胚肾上皮细胞293T,转染效率在70％以上；实时定量PCR和ELISA法结果均显示HBs-siRNA2可有效抑制HBs的表达,抵制率可达80%,而HBs-siRNA1、HBs-siRNA3干扰效果不显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建3种干扰质粒pSUPER-HBs-siRNA,筛选出其中能有效抑制HBs基因表达的pSUPER-HBs-siRNA2序列,为后续研究奠定了基础。
Authors and Affiliations
Xiang-ji LUO
Keywords
Related Articles
- EP ID EP82959
- DOI -
- Views 114
- Downloads 0
熵指数在老年患者七氟醚或丙泊酚靶控输注诱导中的应用
目的:探讨熵指数在老年患者七氟醚吸入或丙泊酚靶控输注诱导时的应用价值。方法:拟行气管插管全麻的老年患者40例,ASA Ⅰ~Ⅱ级,年龄≥65岁,随机分为七氟醚组(S组)和丙泊酚组(P组),分别以七氟醚吸入和丙泊酚靶控输注诱导,诱导期间调节熵指数维...
聚乙烯亚胺介导BMP-7基因体内转染促进老年大鼠骨折愈合
目的：观察聚乙烯亚胺（polyethylenimine,PEI）作为基因载体介导BMP-7基因体内转染促进骨折愈合的效果。方法：20月龄雄性SD大鼠随机分为3组：BMP-7+PEI治疗组、生理盐水对照组及BMP-7对照组（n=20）。所有大鼠建立右股骨干骨折模型，BMP-...
新型生物降解材料PHBV动物体内的组织相容性
目的:通过动物体内实验研究羟基丁酸-羟基戊酸共聚物(PHBV)在小鼠体内的降解行为和组织相容性,进一步探讨生物可降解材料PHBV作为生物医用材料的应用。方法:将PHBV(其中HV含量为9.5%)和对照材料聚乳酸(PLA)植入28只KM小鼠皮下,分别于术后1...
99mTc-MIBI myocardial perfusion image in predicting therapeutic effect of percutaneous coronary intervention
Objective：To observe the 99mTc-MIBI myocardial perfusion images in patients with myocardial infarction before/after percutaneous coronary intervention (PCI),so as to screen for the reliable predictors for the therapeuti...
前列腺癌PSA特异性树突状细胞瘤苗的构建及其体外免疫活性的观察
目的:构建前列腺癌PSA特异性树突状细胞（PSADC）瘤苗，并观察其体外免疫活性，为后续研究奠定基础。方法:分离骨髓前体细胞，大量制备骨髓DCs（bone marrow derived DC,BMDC）；分别以PSA、癌细胞裂解产物（lysate，Lys）、无关蛋白卵清...