Wpływ wielokrotnego, cyklicznego zamrażania i rozmrażania próbki surowicy na poziom przeciwciał klasy IgA, IgG i IgM dla wybranych antygenów bakteryjnych
Journal Title: Medycyna Doświadczalna i Mikrobiologia - Year 2012, Vol 64, Issue 1
Abstract
Introduction. In presented study we investigated the effect of multiple freeze-thaw cycles of human sera on the determination of IgA, IgG and IgM antibodies to selected bacterial antigens. Methods. A panel of 15 serum samples with elevated levels of antibodies to Mycoplasma peumoniae, Yersinia enterocolitica and Salmonella spp. were used (5 positive sera for each pathogen). One set of aliquots designed as the baseline, was taken and stored at 4-8o C for the remainder for the study. The remaining seven sets of aliquots were divided into two parts and repeatedly frozen respectively at two different temperatures: -65oC and -25oC. Once a day the aliquot sets were removed from the freezer and allowed to stand at room temperature for approximately 1 h until completely thawed. For the determination of the level of antibodies the sera after: 2, 5, 10, 15, 20, 25 and 30 freeze/cycle were used. The measurement of IgA, IgG and IgM antibodies was done using a home-made ELISA with four different antigens: whole-cell antigen of M. pneumoniae FH strain, LPS and Yop antigens of Y. enterocolitica serotype O:3 and LPS extracted by Westphal method from Salmonella serogroup B +D. The results were presented as the arithmetic mean of the antibody titre in five sera which were treated by the same number of freeze-thaw cycles. Results. There was no significant statistic difference between levels of antibodies in unfrozen and frozen sera even after 30 freeze-thaw cycles. Depending of the antigen used in ELISA a slight varations in the level of antibodies were observed but the changes were small and not clinically significant. Examination of the ELISA values does not suggest any consistent nonlinear trend in levels of IgA, IgG and IgM antibodies in sera frozen at -65o C as well at -25o C. Conclusions. Our study demonstrates that the IgA, IgG and IgM antibody activity levels measured for M. pneumoniae, Y. enterocolitica and Salmonella antigens are stable even after 30 freeze-thaw cycles. Oceniono wpływ wielokrotnego, cyklicznego zamrażania i rozmrażania próbki surowicy na poziom przeciwciał klasy IgA, IgG i IgM dla antygenów M. pneumoniae, Yersinia enterocolitica i Salmonella sp. Uzyskane wyniki wykazały, że nawet 30-krotne zamrożenie i rozmrożenie próbki surowicy nie ma istotnego wpływu na poziom przeciwciał dla wybranych lipopolisacharydowych i białkowych antygenów bakteryjnych.
Authors and Affiliations
Waldemar Rastawicki, Karolina Śmietańska, Natalia Rokosz, Marek Jagielski
Keywords
Related Articles
- EP ID EP75323
- DOI -
- Views 163
- Downloads 0
Whole cell protein profiling characterization of Corynebacterium diphtheriae clinical isolates collected from various infections Charakterystyka klinicznych izolatów Corynebacterium diphtheriae pochodzących z różnych zakażeń na podstawie profili białek pełnokomórkowych
Corynebacterium diphtheriae posiada zdolność wywoływania zarówno miejscowych jak i inwazyjnych zakażeń. W niniejszej pracy przedstawiono porównanie profili białek pełnokomórkowych uzyskanych z klinicznych izolatów C. dip...
Żelazo niezbędnym substratem pokarmowym enterokoków?
Żelazo jest substratem pokarmowym, którego enterokoki wymagają do wzrostu. Dowiedziono, że żelazo – bez względu na stężenie w pożywce – jest pobierane podczas wzrostu. Niedobór żelaza w pożywce powodował zmiany w kinetyc...
Występowanie pałeczek Escherichia coli z antygenem powierzchniowym K1 u kobiet ciężarnych i noworodków
Oceniono częstość występowania polisacharydowego antygenu K1 wśród 425 szczepów E. coli izolowanych z wymazu z odbytu i 67 szczepów izolowanych z pochwy kobiet ciężarnych oraz wśród 40 szczepów E. coli wyosobnionych z pr...
Konserwatywna struktura C-końcowego fragmentu białka MyfA stanowiącego strukturalny element fimbrii Myf u chorobotwórczych pałeczek Yersinia enterocolitica
Badano polimorfizm fragmentu genu myfA kodującgo C-końcową część białka MyfA stanowiącego główną podjednostkę strukturalną fimbrii Myf u chorobotwórczych pałeczek Yersinia enterocolitica. Badaniami objęto reprezentatywne...
Porównanie trzech testów multiplex real-time PCR do wykrywania DNA wirusów opryszczki typu 1 i 2 Comparison of three multiplex real-time PCR assays for the detection of herpes simplex viruses type 1 and type 2 DNA
Ludzkie wirusy opryszczki typu 1 i typu 2 (HSV-1 i HSV-2) wywołują powszechne na całym świecie zakażenia o różnorodnym przebiegu i nasileniu. Celem pracy było porównanie diagnostycznej wartości zaprojektowanych w Katedrz...