До методики отримання стовбурових клітин міокарда котів
Journal Title: Науковий вісник Львівського національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.З. Гжицького - Year 2018, Vol 20, Issue 88
Abstract
Початком дослідження стовбурових клітин серця можна вважати 2003 рік, коли Beltrami A.P. з колегами підтвердили наяв-ність останніх у міокарді. Пізніше Makkar R.R. та ін. довели ефективність даних клітин за лікування ішемії міокарда. Проте, незважаючи на позитивний ефект від застосування міокардіальних стовбурових клітин за ішемії міокарда, перешкодою для їх масового клінічного застосування є етичні суперечності та складність в отриманні. Зважаючи на вищесказане, метою нашої роботи було визначення оптимального методу отримання стовбурових клітин з міокарду кота. Експерименти на тваринах були виконані відповідно до вимог “Загальних етичних принципів експериментів на тваринах”, схвалених I Національним конгресом з біоетики (20.09.04 р., Київ, Україна). Для отримання тканин серця використовували завмерлі плоди кошенят (за згоди господарів), що залишалися після надання рододопомоги. Для визначення оптимального методу отримання культури стовбурових клітин міокарда кота нами було порівняно метод експланту та методи ферментативної обробки тканин з використанням різних комбінацій ферментів: 2 мг/мл колагенази (тип ІІ); 2 мг/мл колагенази (тип ІІ) з додаванням 5% бичачого сироваткового альбуміну (BSA); 1 мг/мл колагенази (тип ІІ),1 мг/мл гіауронідази та 5% BSA; 2,5% трипсину; 2,5% трипсину, 0,5 мг/мл колагенази (тип ІІ) та 0,5 мг/мл гіалуронідази. Найбільш оптимальним методом отримання культури стовбурових клітин міокарда вважали метод, за якого найшвидше утворювався моношар клітин у одній із чашок Петрі. При цьому враховували кількість клітин у моношарі, які підраховували у камері Горяєва за допомогою мікроскопу при збільшенні у 200 разів. Найбільш ефективним методом отримання культури стовбурових клітин міокарда котів є використання комбінації ферментів: 2,5% трипсину, 0,5 мг/мл колагенази (тип ІІ) та 0,5 мг/мл гіалуронідази, що дозволяє з 10 мг тканин серця отримати 986,0 ± 9,3 тис. клітин, здатних до проліферації. Найменш ефективним виявився метод експланту (без використання ферментів), оскільки кількість прикріплених до культурального пластику клітин за його використання на 5 добу культивування складала 35,7 ± 6,2 тис.
Authors and Affiliations
О. С. Ковпак, В. В. Ковпак, А. Й. Мазуркевич
Keywords
Related Articles
- EP ID EP415837
- DOI 10.32718/nvlvet8828
- Views 101
- Downloads 0
Концентрація солей важких металів у пресованих та сухих хлібопекарських дріжджах
Використання дріжджів у харчовій промисловості широко розповсюджене ще з давніх часів. Науково-технічний прогрес до-поміг перейти виробництву дріжджів на новий щабель та забезпечити високий рівень якості та безпеки гото...
Ризик виникнення та профілактика бронхоспазму фізичного навантаження у представників атлетичних видів спорту
Проблема бронхоспазму, викликаного фізичним навантаженням, є актуальною як у спорті високих досягнень, так і для осіб, що ведуть активний спосіб життя. Висока поширеність БФН в спорті високих досягнень обумовлена інтенси...
Аналіз поводження з побутовими відходами на місцевому рівні
До сьогодні в Україні триває процес прогресуючого нагромадження відходів, проблема збору, переробки, захоронення яких є актуальною для всіх регіонів. Вирішення проблеми у сфері поводження із відходами залишається одним і...
Вплив ферментованого органічного шламу на врожайність і нагромадження нітратного азоту у коренеплодах редиски та агрохімічні показники ґрунту
Стаття стосується особливостей застосування очищеного і збагаченого екологічно чистого ферментованого добрива в процесі метанового бродіння свинячого гною в біогазовій установці для удобрення і отримання екологічно чисто...
Ферум у складі кормових добавок, готових кормів та преміксів на фармацевтичному ринку в Україні
У статті наведені результати досліджень вітчизняного ринку ферумовмісних кормових добавок, готових кормів та преміксів, зареєстрованих в Україні (станом на 1.03.2018). Встановлено, що, на відміну від ферумодекстранових к...