Test kometowy jako metoda identyfikacji niestabilności chromosomów
Journal Title: Advances in Hygiene and Experimental Medicine - Year 2014, Vol 68, Issue
Abstract
Podstawową metodą analizy stopnia fragmentacji DNA na skutek działania czynników genotoksycznych jest elektroforeza żelowa pojedynczych komórek (single cell gel electrophoresis) nazywana testem kometowym (comet assay). Test kometowy umożliwia analizę kilku różnych modyfikacji DNA, przy stosunkowo niewielkich zmianach w podstawowej procedurze testu. Metoda ta identyfikuje jednoniciowe i dwuniciowe pęknięcia DNA oraz wszelkie modyfikacje chemiczne i enzymatyczne, które mogą się przekształcić w pęknięcia DNA lub chromatyd. Test kometowy daje możliwość detekcji uszkodzeń DNA na poziomie pojedynczej komórki. Mogą nim być analizowane dowolne tkanki, z których uzyskuje się zawiesinę komórkową. Analizowane komórki zatapia się w agarozie na szkiełku mikroskopowym. Po wytrawieniu białek pozostaje DNA. Szkiełko poddaje się elektroforezie i barwi substancją fluorescencyjną. Uzyskuje się obraz w postaci „komet”. „Głowa” to miejsce unieruchomienia komórki przed lizą, „ogon” to uszkodzone fragmenty DNA. Miarą poziomu uszkodzeń DNA jest długość ogona i ilość zawartego w nim DNA. Test kometowy znajduje zastosowanie w badaniach aplikacyjnych w toksykologii genetycznej, monitoringu naprawy DNA po chemio- i radioterapii, ekotoksykologii, żywieniu zwierząt i człowieka, biomonitoringu genotoksyczności, epidemiologii, ocenie materiału deponowanego w bankach nasienia i bankach krwi.
Authors and Affiliations
Magdalena Czubaszek, Małgorzata Szostek, Ewa Wójcik, Katarzyna Andraszek
Keywords
Related Articles
- EP ID EP67393
- DOI -
- Views 176
- Downloads 0
Mechanizm włóknienia wątroby – rola komórek gwiaździstych, stresu oksydacyjnego i nitrozacyjnego
Włóknienie wątroby jest długotrwałym i złożonym procesem patologicznym, który występuje u pacjentów z przewlekłymi chorobami tego narządu niezależnie od ich etiologii. Najczęstszą patologią prowadzącą do włóknienia miąż...
Polimorfizm genu CD36 a gospodarka węglowodanowa i osoczowe stężenie CD36 u dzieci otyłych. Doniesienie wstępne
Wprowadzenie: Receptor CD36 to błonowa glikoproteina uczestnicząca w usuwaniu oxLDL (utlenionych cząstek LDL) z osocza, wiązaniu produktów glikacji białek, patogenezie insulinooporności, cukrzycy typu 2, mikro- i makroan...
Nadzór nad grypą
Nadzór nad grypą został zainicjowany w 1947 r., od tego czasu Światowa Organizacja Zdrowia (WHO - World Health Organization) koordynuje współpracę międzynarodową, mając na celu monitorowanie aktywności wirusów grypy, sku...
Wybrane markery biologiczne w niektórych zmianach naczyniowych głowy i szyi
Anomalie naczyniowe dzieli się według współcześnie obowiązującego systemu klasyfikacji na guzy naczyniowe i malformacje naczyniowe, natomiast nieustalone jest w nim jeszcze miejsce naczyniakowłókniaka młodzieńczego. Prze...
Powiązania suchości skóry i świądu u chorych na przewlekłą chorobę nerek
Suchość skóry i świąd należą do najczęstszych zmian skórnych u chorych na przewlekłą chorobę nerek. Zmiany skórne są częstsze i o większym nasileniu w grupie dializowanych, niezależnie od rodzaju dializy, w porównaniu do...